貨源介紹
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細胞名稱:Y1(Y-1)(小鼠腎上腺皮質瘤細胞)
種屬:小鼠
年齡(性別)
組織來源
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
背景描述:Y1(Y-1)細胞是ECA85051002的后備培養物;Y1(Y-1)是一株能分泌鼠類甾類激素、分泌型腎上腺皮質激素的細胞系。
生長培養基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
運輸和保存:干冰運輸及復蘇好存活細胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基;優質胎牛血清,10%;2mM L-谷氨酰胺;NEAA 1%雙抗,1%。
注意事項:培養細胞的過程中細胞會發生堆疊和松散貼壁的細胞團這是正常的。需要2-3天對細胞進行一次換液以保證細胞的正常生長。該細胞貼壁較慢,復蘇細胞后48h內盡量不要移動細胞讓細胞達到最佳的貼壁狀態。生長過程中會懸浮細胞出現,在換液和傳代過程中需要離心回收懸浮的細胞。丟棄懸浮的細胞會使細胞的密度變低,這個細胞在培養過程中不會達到100%的融合。細胞生長過密會引起貼壁的細胞變成懸浮的狀態。明膠或多聚賴氨酸包被的培養瓶可以使細胞更好的貼壁。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
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